Сheatsplace.ru

Медицина и лекарственные средства

Влияние перекисных условий на показатели функциональной активности нейтрофилов перифирической крови человека

Представления о повреждающем действии свободнорадикальных или радикалообразующих продуктов одноэлектронного восстановления кислорода в биологических системах являются доминирующими в течение последних трех десятилетий. Основное внимание привлекают такие формы активированного кислорода, как супероксидный радикал, перекись водорода Н2О2, синглетный кислород О., гидроксильный радикал ОН., а также липидные радикалы, образующиеся в жидкой фазе при распаде гидроперекисей липидов ROOH.

В многочисленных исследованиях было убедительно показано, что окислительные деструктивные процессы, вызываемые повышенными уровнями активированных форм кислорода в конденсированной водной фазе, а также липидными радикалами и гидроперекисями, могут лежать в основе клеточной патологии и сопряженных с нею заболеваний. В целом, результаты этих исследований можно рассматривать как развитие проблемы свободнорадикальной патологии и перекисного окисления в биологических структурах. С этих позиций в настоящее время интерпретируются механизмы сердечно-сосудистой патологии и атеросклероза , дегенеративных заболеваний нервной системы , аутоиммунных и хронических воспалительных заболеваний , старения, злокачественного роста и др.

Не менее важными, но значительно менее изученными, являются представления о биологической роли кислородных радикалов и процессов перекисного окисления в условиях физиологической нормы. Между тем, накапливается все больше фактов, указывающих на важную роль этих активных продуктов и процессов в нормальной жизнедеятельности.

Регуляторное участие активированных форм кислорода в жизнедеятельности клетки в норме установлено в процессах клеточного деления , экспрессии генов и апоптоза , a также в реакциях неферментативной регуляции окислительного стресса, обновлении состава и изменении функциональных свойств биомембран, участии в энергетических процессах, синтезе биологически активных веществ.

Основным механизмом образования эндогенной перекиси водорода в организме является реакция дисмутации, осуществляемая путем восстановления супероксиддисмутазами супероксидного анионрадикала. Источниками супероксидных анионрадикалов являются различные оксидазные системы, среди которых особое место занимает НАДФН-оксидазная реакция, лежащая в основе «респираторного» взрыва, реализующегося в процессе фагоцитарной реакции. Генерация активных форм кислорода является одной из основных цитотоксических функций нейтрофилов. Известно, что недостаточная продукция перекиси водорода нейтрофилами в процессе фагоцитоза при хроническом гранулематозе влечет за собой нарушение противовоспалительных механизмов.

По данным литературы перекись водорода эндогенного происхождения стимулирует накопление в клетке цAMФ и цГМФ, вызывает накопление ионов Са2+ в цитозоле и активацию основных протеинкиназ сигнальных путей и ингибирование протеинфосфатаз; что приводит к активации транскрипционного фактора NF-kB, а это, в свою очередь, вызывает секрецию провоспалительных цитокинов и индуцирует иммунный ответ, а также способствует синтезу и секреции белков острой фазы.

Очевидно, что роль эндогенной перекиси водорода в иммунной системе шире, чем предполагалось ранее и имеет значение не только для процессов фагоцитоза, но для запуска других иммунных процессов. Известно, что активация нейтрофилов периферической крови происходит на фоне "праймированного" состояния. Праймирующий стимул вызывает метаболическую перестройку, не приводящую к активации клетки, следствием его влияния является усиление ответа на последующую активацию. Представление о механизме праймирования фагоцитарной реакции и респираторного взрыва нейтрофилов в настоящее время находится в стадии формирования. Предполагается, что праймирование реализуется в результате перекрестного взаимодействии сигнальных путей, задействованных в первичной сборке и активации NADPH оксидазы.

Ввиду сложности регуляции функций нейтрофилов возникает большой интерес к выяснению причин возникновения патологических процессов, связанных с дисфункцией процессов дегрануляции и усиленной генерации АФК полиморфноядерными гранулоцитами.

Изучение эффектов физиологических медиаторов на функционирование нейтрофилов, в частности, перекиси водорода эндогенного или экзогенного происхождения представляется актуальным для выработки в дальнейшем целенаправленного подхода к терапевтической коррекции нарушений их функциональной активности.

Целью данной работы было изучение влияния окислительных уловий на функциональную активность полиморфноядерных гранулоцитов периферической крови человека in vitro.

Для реализации данной цели были поставлены следующие задачи:

. Изучить влияние моделированных окислительных условий на динамику изменения поглотительной способности и фагоцитарной активности нейтрофилов на различных стадиях протекания фагоцитарной реакции.

. Изучить влияние моделированных окислительных условий на кинетику ферментативных реакций внутриклеточного кислород-зависимого киллинга нейтрофилов в тестах спонтанного и индуцированного восстановления нитросинего тетразолия.

. Изучить влияние моделированных окислительных условий на ферментативную активность миелопероксидазы нейтрофилов в тестах спонтанного и индуцированного окисления ортофенилендиамина.

. Изучить влияние моделированных окислительных условий на способность нейтрофилов к спонтанной и индуцированной адгезии.