Сheatsplace.ru

Медицина и лекарственные средства

Методы лабораторной диагностики вирусного гепатита В

Ход определения

Ингредиенты (мл)

Проба

Контрольный раствор

Субстратный раствор АсАТ

0,5

0,5

Физиологический раствор

-

0,1

Предварительно инкубируют в течении 3 мин при 37°С

Сыворотка крови

0,1

-

Перемешивают, инкубируют точно 60 мин при 37°С

2,4 - ДНФГ

0,5

0,5

Перемешивают и оставляют стоять 20 мин при температуре (от + 15°С до +25°С)

0,4н NaOH

5,0

5,0

Перемешивают, выдерживают 10 минут при комнатной температуре. Колориметрируют при длине волны 530 нм в кювете 1х1 мм, против холостой пробы.

Калибровка

В обозначенные пробирки вносят пипеткой отдельные растворы в вышеприведенном порядке. После добавления реактива 2 содержимое пробирок перемешивают и через 20 мин добавляют раствор NaOH. Через 10 мин измеряют оптическую плотность раствора №2-5 против раствора №1. строят калибровочный график зависимости оптической плотности от концентрации.

Раствор №

Физиологический раствор (мл)

Реактив 4 (мл)

Реактив 1 (мл)

Реактив 2 (мл)

Раствор NaOH

Конечная кат. конц. (мккат/л)

1

0,10

0,50

-

0,50

5,00

0

2

0,10

0,45

0,05

0,50

5,00

0,28

3

0,10

0,40

0,10

0,50

5,00

0,56

4

0,10

0,35

0,15

0,50

5,00

0,83

5

0,10

0,30

0,20

0,50

5,00

1,11 Перейти на страницу: 1 2 3 4 5 6 7 8 9