Сheatsplace.ru

Медицина и лекарственные средства

Данные, полученные методом ФОЕ

Как уже было упомянуто в разделе Материалы и Методы, в основе методики ингибирования фокусообразующих единиц лежит подвление количества фокусов (зараженных вирусом гриппа штамма A/Aichi/2/68 монослоя клеток MDCK) различными концентрациями аналога клеточных рецепторов - блокатора фетуина. Методика пробит - анализа позволила получить необходимый параметр эффективности данного ингибитора на основе полученных экспериментальных зависимостей «Доза ингибитора - ингибирующий эффект».

На рисунке 12 представлена зависимость процента подавления заражения культуры клеток MDCK вирусом гриппа штамма A/Aichi/2/68 от логарифма дозы ингибитора фетуин. Рассчитанный IC50 составляет М.

· Данные метода иммуноферментного анализа (ИФА)

На рис.13 представлено взаимодействие штаммов вируса гриппа с аналогом клеточного рецептора белком фетуином (при +100 С) как в виде экспериментальных точек, так и теоретическое, представляющее собой прямую линию, проведенную через экспериментальные точки в координатах Скэтчарда, согласно уравнению:

Тангенс угла наклона (рисунок 13) характеризует равновесную константу ассоциации. Т.е. чем больше угол наклона прямой, тем меньше константа ассоциации, соответственно больше константа диссоциации. Из данных, приведенных на рисунке 13, получим константу взаимодействия вируса гриппа штамма A/Aichi/2/68 с аналогом клеточных рецепторов белком фетуин (при +100С):

Kd= (0,64±0,1)·10-10М.

Далее аналогичным способом рассматриваются кинетики взаимодействия вируса с культурой клеток линии MDCK при +320С и +100С по данным которых мы сможем определить кинетические параметры, необходимые для решения обратной задачи (рисунки 14,15)

Исследуя зависимости, приведенные на рисунках 14 и 15 были получены кинетические параметры, приведенные в таблице 1

Таблица 1 Кинетические параметры, полученные методом ИФА

Т, 0С

Kd, M

k+, M-1·s-1

k-, s-1

kin, s-1

+10

(3,1±0,3)·10-11

(3,3±0,3)·104

(1±0,1)·10-4

0

+32

(8±0,6)·10-11

(1±0,1)·105

(3±0,4)·10-4

(2±0,2)·10-4 Перейти на страницу: 1 2 3